Elisa試劑盒、elisa實(shí)驗(yàn)原理是什么?

　　Elisa試劑盒、elisa實(shí)驗(yàn)原理是什么?

　　elisa實(shí)驗(yàn)原理是將一定濃度的抗原或者抗體通過物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面，加入待檢標(biāo)本，通過酶標(biāo)物顯色的深淺間接反映被檢抗原或者抗體的存在與否或者量的多少。

　　ELISA技術(shù)作為免疫標(biāo)記技術(shù)(包含免疫熒光技術(shù)，免疫放射技術(shù)，免疫酶技術(shù)和免疫膠體金技術(shù))中的一種，已廣泛應(yīng)用于科研和臨床實(shí)驗(yàn)中，具有快速、定性或者定量甚至定位的特點(diǎn)。

　　ELISA可用于測(cè)定抗原，也可以測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑：固相的抗原或抗體、酶標(biāo)記的抗原或抗體和酶作用的底物。

　　根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件，可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢驗(yàn)方法。

　　檢測(cè)方法

　　一、雙抗體夾心法

　　該方法適用于測(cè)定二價(jià)或二價(jià)以上的大分子抗原，不適用于測(cè)定半抗原及小分子單價(jià)抗原，因其不能形成兩位點(diǎn)夾心。

　　二、競(jìng)爭(zhēng)法

　　該方法一般用來檢測(cè)具有較少表位的小分子物質(zhì)，當(dāng)然，這種方法也可以用來檢測(cè)大分子抗原物質(zhì)甚至是抗體。檢測(cè)大分子抗原物質(zhì)時(shí)，由于空間位阻的影響，使得該檢測(cè)方法沒有雙抗體夾心法檢測(cè)大分子抗原物質(zhì)靈敏度高。

　　三、間接法測(cè)抗體

　　本法只要更換不同的固相抗原，可以用一種酶標(biāo)抗體檢測(cè)各種與抗原相應(yīng)的抗體。主要用于對(duì)病原體的檢測(cè)而進(jìn)行傳染病的診斷。

　　四、雙抗原夾心法測(cè)抗體

　　雙抗原夾心法與間接法都可以對(duì)抗體進(jìn)行檢測(cè)。

　　五、捕獲法測(cè)抗體

　　將抗IgM抗體包被于固相微孔板，用無關(guān)蛋白載體對(duì)未結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行封閉后，加入待測(cè)樣本，接著加入抗原物質(zhì)，然后加入針對(duì)該抗原的經(jīng)生物素標(biāo)記的特異性抗體和HRP標(biāo)記的鏈霉親和素，經(jīng)TMB底物顯色和終止反應(yīng)后即可計(jì)算濃度。

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