PCR八聯(lián)管用戶可以選擇負(fù)壓或離心法使用

　　PCR八聯(lián)管用戶可以選擇負(fù)壓或離心

　　A、負(fù)壓法

　　1、正確連接負(fù)壓裝置，將96孔DNA制備板放在負(fù)壓裝置上;在PCR，酶消化，酶標(biāo)記或測序反應(yīng)溶液中加入3倍緩沖液PCR-A(如果緩沖液PCR-A小于100μl，加入100μl);充分混合并轉(zhuǎn)移至96孔DNA制備板，打開并調(diào)節(jié)負(fù)壓至-25-30英寸汞柱，并緩慢吸出板中的溶液。

　　2、加入0.3ml緩沖液W2并吸收溶液。用相同的方法用0.3ml緩沖液W2洗滌兩次。

　　確認(rèn)在試劑瓶上的指定體積的緩沖液W2濃縮物中加入無水乙醇。

　　3、維持負(fù)壓并提取96孔DNA制備板10分鐘。

　　4、在長纖維組織上將96孔DNA制備板粉碎6次，引流管朝下。

　　5、將96孔DNA制備板置于96孔V形板上，加入25-30ul水或洗脫至膜中心，在室溫下靜置1分鐘。通過以3000×g離心5分鐘洗脫DNA。

　　B、離心

　　1、在PCR，消化，酶標(biāo)記或測序反應(yīng)中加入3倍體積的BufferPCR-A(如果BufferPCR-A小于100μl，加100μl);混合并轉(zhuǎn)移到制備板96孔中的96孔DNA中。將DNA制備板置于96孔1.6ml深孔板中，以1000×g離心1分鐘，棄去濾液。

　　2、在96孔DNA制備板中，加入0.3ml緩沖液W2，以1000×g離心1分鐘，棄去濾液。用0.3ml緩沖液W2以相同方式再次洗滌。確認(rèn)在試劑瓶上的指定體積的緩沖液W2濃縮物中加入無水乙醇。

　　3、將96孔DNA制備板置于96孔1.6ml深孔板中，并以3000×g離心10分鐘。

　　4、將96孔DNA制備板置于干凈的96孔V形底板中，加入25-30ul水或洗脫至膜中心，在室溫下靜置1分鐘。通過以3000×g離心5分鐘洗脫DNA。

　　注意事項：

　　1、將洗脫液或水加熱至65°C有助于提高洗脫效率。

　　2、DNA分子是酸性的，建議儲存在2.5mMTris-HCl，pH8.5洗脫液中。